大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

基本屬性：

細(xì)胞名稱：大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 

組織來(lái)源：眼角膜組織

商品貨號(hào)：LZ-YX9674

種屬來(lái)源：大鼠

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分，占據(jù)角膜厚度的90%，由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點(diǎn)，正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分，維持角膜的透明度，此細(xì)胞對(duì)于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下，處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí)，不同上皮來(lái)源的因子及環(huán)境信號(hào)，將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng)，決定著角膜能否完全被修復(fù)。

培養(yǎng)基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈梭形、多角形，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。          

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養(yǎng)基(補(bǔ)加1%FBS，促進(jìn)貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

原代細(xì)胞試用的實(shí)驗(yàn)類型：

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞規(guī)格上海前面我們了解了原代細(xì)胞獲取和培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該注意的一些細(xì)節(jié)，這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細(xì)胞。那么原代細(xì)胞培養(yǎng)好后，它可適用哪些研究呢？

原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應(yīng)用中幾乎都涉及了幾個(gè)常見(jiàn)的且基礎(chǔ)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，如下：

一、細(xì)胞增殖檢測(cè)：

常見(jiàn)檢測(cè)方法：CCK8檢測(cè)法 ，MTT檢測(cè)法，Brdu檢測(cè)法，Edu檢測(cè)法，平板克隆形成

二、細(xì)胞周期檢測(cè)

常見(jiàn)檢測(cè)方法：流式檢測(cè)細(xì)胞周期，標(biāo)記有絲分裂百分率法

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞品牌三、細(xì)胞凋亡檢測(cè)

常見(jiàn)檢測(cè)方法：流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測(cè)，Hoechst染色，電鏡，TUNEL

四、細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力檢測(cè)

常見(jiàn)檢測(cè)方法：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，Transwell實(shí)驗(yàn)，Invasion實(shí)驗(yàn)

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠半乳凝素2(GAL2)ELISA試劑盒 ，英文名： GAL2 ELISA Kit

人重組激活基因2(RAG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit 96T/48T

大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體試劑盒 Rat proliferating cell nuclear aigen(PCNA)aibody ELISA kit

英文名稱RatFSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞ATP生物發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitfractalkine/CX3CL1人神經(jīng)趨化蛋白規(guī)格：48T/96T

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)Elisa 試劑盒

Rat macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒

Humanai-Reticulinaibody,ARAELISAKit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanalcoholdehydrogenase,ADHELISA試劑盒人脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原

PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞CD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原 0.5mgCD146/MCAM 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原

ALDH3A1 Protein Human 重組人 ALDH3A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLEC14A重組小鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PHOSPHO1重組人 PHOSPHO1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein