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TRIS緩沖液優(yōu)缺點及其衍生緩沖液作用

更新時間:2022-02-09 [舉報]
緩沖液(Buffersolution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。Buffer的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。在生化實驗及其相關(guān)研究工作中,經(jīng)常需要大量的緩沖液來維持實驗體系的酸堿度。其中TRIS及其衍生緩沖液,在有機合成、涂料、防火材料以及生化和醫(yī)藥領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用,那么,在實際應(yīng)用中有什么優(yōu)缺點?

了解TRIS緩沖液

Tris,又稱三羥甲基氨基甲烷,Tris緩沖液應(yīng)用越來越廣泛,尤其是核酸DNA相關(guān)的研究實驗中,比PBS磷酸鹽緩沖液更有優(yōu)勢。另一方面,Tris也是合成另一種生物緩沖劑TAPS的重要原料。Tris優(yōu)點非常明顯,其PH緩沖范圍在7-9,堿性較強,可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液;同時因為其不與重金屬發(fā)生沉淀,可以一起作用,對生物化學過程干擾很小。因此Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲(C.elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的PH。

Tris緩沖液也有一些缺點需要注意:1、Tris緩沖液PH受濃度影響很大;2、受溫度效應(yīng)影響大,例如在室溫25℃左右,pH是7.8的Tris一緩沖液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配制的緩沖液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍。且它在pH7.5以下,緩沖能力很差。幾種常見的Tris衍生緩沖液

1、TBS緩沖液主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,PH7.4,是生物學中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于組化和原位雜交,酶聯(lián)等實驗中,清洗印跡實驗中非特異性結(jié)合的抗體等。

2、TBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液,為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液,主要由Tris-HCl、NaCl、tween20組成,pH7.2-7.5,主要用于組化和原位雜交,酶聯(lián)等實驗中,清洗印。

3、TE緩沖液是由Tris和EDTA配制而成,一種電泳緩沖液,PH8.0,主要用于溶解核酸,能穩(wěn)定儲存DNA和RNA。

4、TAE緩沖液是由Tris、乙酸和EDTA組成的緩沖液,ph7.2-8.4,是大片段DNA短時間電泳時廣泛使用的緩沖系統(tǒng);

5、TBE緩沖液是由Tris堿,硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)組成的緩沖溶液。TBE緩沖液通常用于瓊脂糖凝膠電泳,以分析由PCR擴增,DNA純化方案或DNA克隆產(chǎn)生的DNA產(chǎn)物。

湖北新德晟是從事生物緩沖液、采血管添加劑、化學發(fā)光試劑以及發(fā)光底物等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售一體高科技公司。十五年發(fā)展,德晟已擁有龐大的研發(fā)團隊和實驗基地,生物緩沖劑已形成包含TRIS、HEPES、TAPS、MOPS、CAPS、BICINE、EPPS、PIPES等一系列生物緩沖液?,F(xiàn)在生物緩沖劑產(chǎn)品不僅在占有率高,已銷往幾十個國家,與眾多大型生物醫(yī)療科技型企業(yè)建立長久穩(wěn)定合作。
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