雞上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD326)ELISA試劑盒 

試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結(jié)合，因此試驗(yàn)的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗(yàn)的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗(yàn)操作相對簡單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

  

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內(nèi)的試管，操作中避免任何細(xì)胞，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

 雙夾心：本法主要用于檢測大分子抗原?，F(xiàn)以檢測雞傳染性法氏囊?。↖BDV）的雙夾心ELISA為例介紹本法的操作程序。① 加包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。

實(shí)驗(yàn)原理

      試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、品、HRP標(biāo)記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

 

 

 

 雞上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD326)ELISA試劑盒

 

操作步驟

 

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質(zhì)結(jié)合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結(jié)合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標(biāo)記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

 

 

此套件的交貨時(shí)間為2-3天。*保存溫度：2 - 8 C。*保質(zhì)期：6個月。*國內(nèi)快遞.

標(biāo)本的采集及保存

1.：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

3.細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注：標(biāo)本溶血會影響**檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。) 

 

 

 

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應(yīng)的OD值，利用品繪制的曲線，計(jì)算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過計(jì)算待測樣品的濃度。

 

 

 

 

免責(zé)聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

點(diǎn)ELISA：與常規(guī)的微量板ELISA比較，Dot-ELISA具有簡便、節(jié)省抗原等優(yōu)點(diǎn)，而且結(jié)果可長期保存；但其也有不足，主要是在結(jié)果判定上比較主觀，特不夠高等。該的主要操作程序?yàn)椋孩泡d體膜的預(yù)處理及抗原包被　取纖維素膜用蒸餾水浸泡后，稍加干燥進(jìn)行壓圈。將陰性、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中，置37℃使纖維素膜干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點(diǎn)加40－53個樣品，每個壓圈可加抗原液1－20μl。⑵ 封閉　將纖維素膜置于封閉液中，37℃感作15－30分鐘。封閉液多采用含有正常動物、pH7.2或pH7.4的PBS。⑶ 加被檢　可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再加入一定量適度稀釋的待檢，37℃反應(yīng)一定時(shí)間，用洗滌液洗三次，每次1－3分鐘。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。⑷ 加酶標(biāo)，37℃反應(yīng)一定時(shí)間后，用洗滌液洗三次。⑸顯色　加入新鮮配制的底物液，37℃反應(yīng)一定時(shí)間后，去掉底物液，加蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。⑹ 結(jié)果判定　以陽性、陰險(xiǎn)作為對照，膜片出現(xiàn)深棕紅色點(diǎn)者為陽性反應(yīng)，否則為陰性反應(yīng)。