雞甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)ELISA試劑盒
自從Engvall和Perlman(1971)報(bào)道建立酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點(diǎn),使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐,但隨著的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對(duì)某一抗原表位的單克隆進(jìn)行ELISA試驗(yàn),都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實(shí)用和化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測之一。
如今ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動(dòng)物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測。其操作步驟如下:1.包被:將抗原或與酶結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或,并固定在固相載體上。2.洗滌:去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉:加入封閉液,封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn),以非特結(jié)合。4.洗滌:去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣:加入待檢測的樣本,使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌:去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標(biāo):使固相載體上的抗原或與酶標(biāo)結(jié)合,將抗原或間接標(biāo)記上酶。8.洗滌:去除未結(jié)合的酶標(biāo)和雜質(zhì)。9.顯色:加入底物,使酶催化底物生成有色產(chǎn)物,根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是,具體的操作步驟可能因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)、試劑品牌等不同而有所差異。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)手冊進(jìn)行操作,控制好實(shí)驗(yàn)條件和操作步驟,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
90分鐘一步法ELISA試劑盒可以適用于、、組織勻漿、細(xì)胞上清液等樣本類型。這些樣本可以用于檢測、和其他微生物等病原體,以及、自身性等病理情況。同時(shí),ELISA試劑盒還可以用于檢測濃度、維生素等營養(yǎng),以及污染物等有害的殘留量。需要注意的是,不同樣本類型和檢測項(xiàng)目可能對(duì)ELISA試劑盒的靈敏度和特產(chǎn)生影響,因此在選擇使用ELISA試劑盒時(shí)需要根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)的優(yōu)點(diǎn)包括:1.高靈敏度:ELISA可以檢測出微量的抗原或,其靈敏度通常比其他學(xué)更高。2.高特:ELISA僅與特定的抗原或結(jié)合,因此不易受到其他的,具有較高的特。3.快速:ELISA操作簡便、快速,可以在短時(shí)間內(nèi)結(jié)果.4.易操作:ELISA實(shí)驗(yàn)操作相對(duì)簡單,易于化和自動(dòng)化,因此適合于大規(guī)模樣品的檢測。5.應(yīng)用范圍廣:ELISA可以用于檢測多種生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,因此在醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。6.無放射性核素污染:與放射測定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更為安全、環(huán)保??傊珽LISA是一種高靈敏度、高特、快速、易操作的學(xué)技術(shù),具有廣泛的應(yīng)用前景。
雞甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)ELISA試劑盒
特性
用于標(biāo)記或抗的酶須具有下列特性:有高度的活性和性;在室溫下;反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn);能商品化生產(chǎn)。如今應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應(yīng)用廣。
辣根過氧化物酶
過氧化物酶(HRP)廣泛分布于植物中,辣根中含,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個(gè)酸組成,等電點(diǎn)為pH 3-9,催化反應(yīng)的適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的銨溶液。酶蛋白和輔基吸收光譜分別為275nm和403nm。
酶的純度以RZ表示:RZ=OD403/OD275
純酶的RZ多在3.0以上為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶,非酶蛋白約占 75%,不能用于標(biāo)記。RZ在2.5以上者方可用于標(biāo)記。HRP的作用底物為,催化反應(yīng)時(shí)的供氫體有幾種:⑴鄰苯二胺(OPD),產(chǎn)物為橙色,可溶性,性高吸收值在490nm,可用觀察判別,容易被濃終止反應(yīng),顏色可在數(shù)小時(shí)內(nèi)不改變,是目前國內(nèi)ELISA中常用的一種;⑵茴香胺(OD),產(chǎn)物為橘吸收值在400nm,顏色較;⑶5-(5-AS):產(chǎn)物為深棕色吸收值在449nm,部分溶解,性較差;⑷鄰聯(lián)甲苯胺(OT)產(chǎn)物為藍(lán)色吸收值在630nm,部分溶解,不,不耐酸,但反應(yīng)快,顏色明顯。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測。其操作步驟如下:1.包被:將抗原或與酶結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或,并固定在固相載體上。2.洗滌:去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉:加入封閉液,封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn),以非特結(jié)合。4.洗滌:去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣:加入待檢測的樣本,使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌:去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標(biāo):使固相載體上的抗原或與酶標(biāo)結(jié)合,將抗原或間接標(biāo)記上酶。8.洗滌:去除未結(jié)合的酶標(biāo)和雜質(zhì)。9.顯色:加入底物,使酶催化底物生成有色產(chǎn)物,根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是,具體的操作步驟可能因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)、試劑品牌等不同而有所差異。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)手冊進(jìn)行操作,控制好實(shí)驗(yàn)條件和操作步驟,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)在多個(gè)行業(yè)都有應(yīng)用,特別是在醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域中了廣泛應(yīng)用。以下是一些應(yīng)用ELISA的行業(yè):1.醫(yī)學(xué)診斷:ELISA被廣泛應(yīng)用于各種和等的診斷,如、、結(jié)核病等。在動(dòng)物檢疫方面,ELISA已為廣泛采用的,例如用于診斷豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等。2.生物技術(shù)研發(fā):ELISA可以用于檢測生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。例如,在研發(fā)中,ELISA可以用于檢測的生物活性、與靶點(diǎn)的結(jié)合情況等。3.食品安全檢測:ELISA可以用于檢測食品中的有害,如殘留、獸藥殘留等,保障食品安全。4.監(jiān)測:ELISA可以用于評(píng)估水質(zhì)、空氣等指標(biāo),監(jiān)測狀況??傊?,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、食品安全和監(jiān)測等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
堿性酶
系從小牛腸和大腸桿菌中提取,由多個(gè)同功酶組成。它們的底物種類很多,常用者為鹽,廉價(jià)性。酶解產(chǎn)物呈,可溶吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應(yīng)中,37℃1分鐘水解1μg苯二鈉為一個(gè)單位。