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DNA甲基化檢測(cè)服務(wù)（BisulfitesequencingPCR，BSP）

更新時(shí)間：2018-02-07 信息編號(hào)：153300900
DNA甲基化檢測(cè)服務(wù)（BisulfitesequencingPCR，BSP）

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DNA甲基化檢測(cè)服務(wù)（BisulfitesequencingPCR，BSP）

產(chǎn)品別名
DNA甲基化檢測(cè)服務(wù)
面向地區(qū)
亞硫酸氫鹽測(cè)序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）的DNA甲基化檢測(cè)方法具有較高可靠性及度，能得出片段中每一個(gè)CpG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)。

實(shí)驗(yàn)原理
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。針對(duì)目標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序就可以判斷哪些CpG位點(diǎn)發(fā)生了甲基化；一般將PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測(cè)序成功率會(huì)比較高。


服務(wù)的流程
1. BSP引物設(shè)計(jì)：針對(duì)感興趣的基因區(qū)域進(jìn)行BSP引物的設(shè)計(jì)
2. 亞硫酸氫鹽處理基因組DNA：提取基因組DNA并進(jìn)行亞硫酸氫鹽的轉(zhuǎn)化
3. PCR擴(kuò)增目的片段：BSP引物擴(kuò)增感興趣的區(qū)域
4. 克隆到載體：將PCR產(chǎn)物純化后連接到載體上
5. 克隆測(cè)序：挑取陽(yáng)性菌斑，提取質(zhì)粒并測(cè)序（10個(gè)克?。?br /> 6. 序列分析：對(duì)測(cè)序的結(jié)果進(jìn)行比對(duì)和甲基化分析

項(xiàng)目周期
15-20個(gè)工作日

項(xiàng)目交付
1、提供完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告
2、電泳圖譜
3、測(cè)序圖譜
4、序列比對(duì)圖譜
5、分析數(shù)據(jù)

注意事項(xiàng)
1、客戶提供：要調(diào)查的基因名稱、種屬，要調(diào)查的甲基化區(qū)域或位點(diǎn)；
2、樣品要求：細(xì)胞≥105個(gè)；組織≥100mg；全血≥0.5ml；基因組DNA ≥5ug；
3、所有樣品建議干冰寄送，保持低溫，樣品質(zhì)量；
4、每個(gè)檢測(cè)片段序列長(zhǎng)度不超過(guò)350bp。

廣州表觀生物科技有限公司 8年

  • 生物學(xué)技術(shù)開發(fā),生命科學(xué)研究
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