PCR檢測試劑盒有效期一般為1年,這是指在適當(dāng)?shù)膬Υ鏈囟认?。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。上海
產(chǎn)品名稱:旋覆花探針法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Flos inulae
產(chǎn)品貨號:LZ-P2870
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的高點。
【質(zhì)控標準】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性,無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復(fù)核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
?、趬A基配對原則;
?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。
旋覆花探針法PCR其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
PCR檢測步驟:
1、旋覆花探針法試劑盒樣品處理
1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質(zhì),調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。
2)36±1℃培養(yǎng)18-24h。
注:也可參考其他地方標準進行樣品的前處理。
2、核酸提取
1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。
2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。
3、反應(yīng)體系配置
從試劑盒中取出SA預(yù)混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4、PCR擴增
PCR管置于PCR儀上,推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下:反應(yīng)體系為25μL,在第二步每個循環(huán)60℃時檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)PCR檢測試劑盒 , E-Selectin/CD62E ELISA Kit
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA檢測試劑盒RatmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1ⅢELISAKit
人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)試劑盒 Human DNMT3A ELISA Kit
英文名稱MouseBonemorphogeneticproteieceptor1AELISAKit小鼠骨成型蛋白質(zhì)受體1A(BMPR1A)
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVETISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50次
Ratai-doublesandedDNA,dsDNAPCR檢測試劑盒大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)PCR檢測試劑盒
人抗弓形體IgM抗體(ai-tox IgM)ELISA
小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒 Mouse Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hNP E)PCR檢測試劑盒 , hNP E ELISA Kit
MouseActivinA,ACV-APCR檢測試劑盒小鼠活化素A(ACV-A)PCR檢測試劑盒
ELISAKitPABA小鼠對規(guī)格:48T/96T
Human26Sproteasome,26SPSMELISAKit人26S蛋白酶體(26SPSM)PCR檢測試劑盒
旋覆花探針法PCR鑒定試劑盒Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化還原蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標記0酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體 規(guī)格 0.1ml
sCD38(Human Soluble Cluster of differentiation 38) ELISA Kit 人可溶性CD38 96T
Phospho-Mst1(Thr183) + Mst2(Thr180) 英文名稱: 0酸化蛋白激酶MST抗體 0.1ml
ADAR1 (C-terminus) 英文名稱: 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗體(C端) 0.2ml
Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標記0酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名:陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
胰酶細胞消化液(不含EDTA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酶細胞消化液,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管
3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基