糜蛋白酶試劑盒/胰凝乳蛋白酶試劑盒紫外分光光度法說(shuō)明書(shū)

紫外分光光度法 50管/48樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品名稱(chēng)：糜蛋白酶試劑盒/胰凝乳蛋白酶試劑盒紫外分光光度法

貨號(hào)：LZ-S01177-A

規(guī)格 : 50管/48樣

測(cè)試方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品分類(lèi)：蛋白酶系列

發(fā)貨地：上海

測(cè)定意義：

糜蛋白酶，又稱(chēng)胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變形蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。

測(cè)定原理：

糜蛋白酶催化N-Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA水解，產(chǎn)物在410nm有特征光吸收；通過(guò)測(cè)定410 nm 光吸收增加速率，來(lái)計(jì)算糜蛋白酶活性。

自備儀器和用品：

臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存。

粗酶液提取：

組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，

加入 1mL 提取液）冰浴勻漿，8000g，4℃離心 10min，取上清，即粗酶液。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

生化檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題：

在使用生化檢測(cè)試劑盒時(shí)，可能會(huì)遇到一系列常見(jiàn)問(wèn)題，這些問(wèn)題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。以下是一些常見(jiàn)的問(wèn)題及其解決方法：

一、?測(cè)定原理?：生化試劑盒通過(guò)化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測(cè)定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測(cè)定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測(cè)定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測(cè)波長(zhǎng)，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購(gòu)買(mǎi)前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開(kāi)包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號(hào)的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測(cè)定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測(cè)定。對(duì)于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測(cè)定?：對(duì)于土壤酶活性的測(cè)定，建議將鮮土風(fēng)干并過(guò)篩后取樣，以測(cè)定的重復(fù)性。若使用鮮土測(cè)定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測(cè)定?：在進(jìn)行正式測(cè)定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)預(yù)測(cè)定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測(cè)定結(jié)果真實(shí)可靠?。

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