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供應(yīng)商	上海聯(lián)祖生物科技有限公司店鋪
認(rèn)證
報價	人民幣 715.00元每盒
關(guān)鍵詞	谷氨酸脫氫酶,微量法,試劑盒
所在地	上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

谷氨酸脫氫酶（GDH）試劑盒微量法說明書

微量法 100管/96樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

商品屬性：

產(chǎn)品名稱：谷氨酸脫氫酶（GDH）試劑盒微量法

貨號：LZ-S0192

規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法:微量法

產(chǎn)品分類：氮代謝系列

發(fā)貨地：上海

測定意義:

GDH（EC 1.4.1.2）廣泛分布于植物中，和谷氨酸合成酶（GOGAT）共同參與谷氨酸的合成，在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作用。

測定原理:

GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+，引起340nm吸光度下降。通過測定340nm吸光度的下降速率，計算GDH活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×2 瓶，4℃保存；

NAD+和 NADH 的提取:

1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

NADH 的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g

組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

生化檢測試劑盒操作步驟：

一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?：確保操作臺面干凈、整潔，這是進(jìn)行科學(xué)實驗的步。

?二、?仔細(xì)閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。

三、樣本采集?：按照說明書的指導(dǎo)，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。

?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測的準(zhǔn)確性。

?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個時間可以用來進(jìn)行其他活動，但不要著急，因為好的結(jié)果值得等待。

六、結(jié)果判讀?：時間到后，仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。

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注意事項:

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。

所屬分類：化學(xué)助劑/試劑盒

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谷氨酸脫氫酶（GDH）試劑盒微量法

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