產(chǎn)品名稱：雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基

貨號：LZ-PYJ4126

英文名稱：Bifidobacterium BS Medium

產(chǎn)品規(guī)格：250g

用途：用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)。

成分(g/L)：

蛋白胨 15.0

 20.0

酵母浸粉 2.0

可溶性淀粉 0.5

氯化鈉 5.0

L-半胱氨酸 0.5

番茄浸粉 5.0

肝浸粉 0.3

瓊脂 20.0

pH值6.8±0.2 25℃

用法：稱取本品70.0g，再吸取吐溫80 1ml，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15-20min，備用。

主要包括：

計算—稱量—溶解—調(diào)pH—分裝—滅菌——倒平板等。

計算：，根據(jù)配方計算各種營養(yǎng)成分的用量。

稱量：使用電子天平準(zhǔn)確稱取所需，遵循由含量低到含量高的稱量原則。

溶解：將稱好的成分放入相應(yīng)玻璃容器中，加入所需量的水，加熱使其完全溶解。對于液體培養(yǎng)基，建議使用純化水。若配制固體培養(yǎng)基，則需稱取適量的瓊脂放進已稱量好的培養(yǎng)基中，繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解。

調(diào)pH值：待培養(yǎng)基稍冷卻后，按配方要求調(diào)整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）調(diào)整所配培養(yǎng)基的pH。加堿（或酸）溶液時，應(yīng)邊滴加邊攪拌，直至后調(diào)至要求的pH值。

分裝：根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同的三角燒瓶、試管等。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時外溢。分裝量根據(jù)使用目的和要求決定，但定量分裝，便于應(yīng)用。

滅菌：應(yīng)按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時進行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃、15min高壓濕熱滅菌法，以滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。

倒平板：滅菌后取出的固體培養(yǎng)基，根據(jù)需要可將試管立即斜放，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進菌種。

此外，還包括一些注意事項和操作細(xì)節(jié)，如使用度1/100的電子天平稱取、避免使用銅或鐵的容器溶化培養(yǎng)基、調(diào)整pH時考慮高壓滅菌后的pH變化等。

1、上海準(zhǔn)備好干粉培養(yǎng)基、三角瓶、藥勺、無菌平皿、油性筆等。在瓶身上標(biāo)注好培養(yǎng)基的

相關(guān)信息。

2噬菌體MS2液體培養(yǎng)基、將三角瓶置于電子天平上，調(diào)零。按照需要用量，用藥勺把干粉培養(yǎng)基添加到三角瓶中。

3、培養(yǎng)基稱量之后及時蓋上培養(yǎng)基瓶蓋，擰緊。用量筒量取適量的蒸餾水或者去離子水。

4、先加入小部分水以濕潤干粉，避免粉塵揚起。再加入剩余的水量。充分搖勻。

5、將培養(yǎng)基加熱煮至沸騰三次，應(yīng)可見溶液澄清透亮，無明顯瓊脂顆粒掛壁，分層等現(xiàn)象。

6、塞上透氣硅膠塞，包上牛皮紙或者報紙，包扎好。放入高壓滅菌鍋中滅菌。（按需設(shè)定滅

菌溫度、時間）

7、暫時不使用的培養(yǎng)基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保溫。倒平板時，在超凈工作臺或

生物安全柜中準(zhǔn)備好無菌平皿、記號筆等。

8、顆粒培養(yǎng)基拆開包裝后，將無菌培養(yǎng)皿倒置，在底部邊緣寫上平板相關(guān)信息。

9、將標(biāo)記好的無菌平皿翻轉(zhuǎn)過來，當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃左右時，傾倒培養(yǎng)基。

10、倒完后可輕輕圓周搖晃平板三圈，使平板邊緣整齊。將平板鋪開可加速瓊脂冷卻凝固。

11、使用之前，將平板倒置于無菌實驗室內(nèi)的烘箱中，55℃、15 分鐘。烘干平板表面水分。

12、將暫時不使用的平板用報紙包成筒狀，用記號筆標(biāo)清楚平板的種類、配制日期。

13、然后放進2-8℃的冰箱中保存。用時取出放置室溫下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分鐘。

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